Os objetivos deste trabalho foram detectar e evidenciar preliminarmente os mecanismos bioquímicos de resistência a inseticidas fosforados em populações de Leucoptera cofeella. Na sua execução foi utilizado como material biológico dez populações de L. cofeella de diferentes regiões produtoras de café do Estado de Minas Gerais, que foram coletadas a campo e mantidas em gaiolas em casa de vegetação, além de uma população do cafezal adjacente ao viveiro de mudas de café da Universidade Federal de Viçosa, utilizada como padrão de susceptibilidade. Em cada local de coleta foi preenchido um questionário sobre uso de inseticidas e falhas de controle. Inicialmente foram feitos bioensaios com 3o instar larval do bicho-mineiro com o padrão de suscetibilidade (população de Viçosa) para obtenção de faixas de respostas, que serviram como parâmetro referencia1 na preparação das concentrações dos bioensaios definitivos de concentração-resposta. Os dados de mortalidade obtidos foram submetidos à análise de próbite para estimação das concentrações letais para 99% de mortalidade (CL99) para cada inseticida, que foram então usadas como concentrações discriminatórias na detecção de resistência nas populações sob estudo. O estudo dos prováveis mecanismos bioquímicos de resistência desta praga aos inseticidas foi feito através do uso de concentrações letais discriminatórias de inseticidas em misturas com sinergistas na população suscetível. Os resultados obtidos mostraram resistência na maioria das populações, com oito populações apresentando este fenômeno ao inseticida dissulfotom, cinco ao etiom, quatro ao paratiom-metílico e apenas uma população apresentou resistência ao inseticida clorpirifós. As populações de Araguari, Patrocínio, São Gotardo e Bambuí foram resistentes a maioria dos inseticidas sob estudo, destacando a população de Araguari que mostrou este fenômeno aos quatro inseticidas estudados. Dados obtidos dos questionários sobre uso de inseticidas, mostraram o largo uso de inseticidas nas regiões de cerrado, com algumas localidades atingindo um total de 20 aplicações por ano agrícola. Modelos de regressão múltipla mostraram associação entre grupos de inseticidas, que podem estar selecionando em favor da resistência aos inseticidas estudados, além da evidência de efeito de inseticidas ou grupos de
inseticidas negativamente correlacionados aos compostos em estudo, que desfavorecem a seleção de populações resistentes a estes. Com relação ao estudo de sinergismo, os sinergistas butóxido de piperonila e dietil-maleato suprimiram significativamente a resistência, sugerindo que destoxificação metabólica por monooxigenases dependentes do citocromo P450 e glutations-S-transferases sejam os principais mecanismos de resistência de L. coffeeella a estes inseticidas, com um menor envolvimento de esterases, o que indica também um possível desenvolvimento de resistência múltipla a inseticidas fosforados.
The objectives of this study were to detect resistance of Leucopera coffeeella to the insecticides chlorpyriphos, disulfoton, ethion and methyl-parathion and to preliminarly identify the probable resistance mechanisms involved. The biological material used encopassed ten populations of L. coffeeella from the counties of Araguari, Bambuí, Cambuquira, Capelinha, Caparaó, Guiricema, Ponte Nova, São Gotardo, Simonésia and Patrocínio, State of Minas Gerais, that were field-collected and reared in cages within a greenhouse. An additional population from an area adjacent to the coffee nursery of the Federal University of Viçosa was used as susceptibility standard. At first, preliminary biossays were carried out using 3rd instar larvae of L. coffeeella of the susceptible population to obtain the range of concentrations to be used in the concentration-response bioassays aiming the determination of the LC99. The data obtained from the concentration-response biossays were subjected to probit analysis to estimate the CL99 for each insecticide, which were used as discriminatory concentrations to recognize the resistance populations. Multiple regression analysis, was used to evidence the association between the frequency of resistant individuals with the insecticide use and occorrence of cross-selection, leading to development of insecticide resistance to organophosphates. In the study of the probable resistance mechanisms of L. cofeella to these insecticides, bioassays with insecticide plus sinergyst were carried out for the susceptible population using the s h e metodology referred above with the goal of obtainning the LC99 to be used to identify' the probable main detoxification enzymes involved in the resistance. The results showed resistance in the majority the insect populations studied, being eight populations resistant to disulfoton, five to ebon, four to methyl-parathion, and just one showed resistance to chlorpyriphos. The Araguari population showed this phenomen to the four insecticides in study. Data collected about insecticides use showed the large use of insecticides in the savava region, with some localities reaching twenty sprays per year. Models of multiple regression showed association between insecticides classes, which might be contributing positively as well as negatively to cross-selection The sinergyst piperonyl-butoxid and diethyl-maleate significant supplanted the resistance, suggesting that detoxification by cytochrome P450-dependent monooxygenases and glutathion-S-transferases be the main resistance mechanisms to organophosphates insecticides in L. coffeellu; detoxification by esterases seem to play a minor role on organophosphate resistance in this insect-pest, suggesting a possible case of multiple resistance.
